MÉTODO CUANTITATIVO DE DILUCIÓN

 

OBJETIVO: Utilización de un método que nos sirve para hacer una evaluación de la intensidad de ciertas helmintosis como ascarosis, tricocefalosis, uncinaroisis, himenolepiosis y estrongiloidosis.

 

GENERALIDADES: En 1923 Stoll y colaboradores describieron el método de dilución que lleva su nombre utilizando como solución diluyente Hidróxido de Sodio décimonormal. Este método se basa en los principios de saponificación, homogenización y aclaración. El NaOH 0.1 N al ponerse en contacto con las grasas de las heces se saponifica, hace que los huevos de los parásitos sean menos pegajosos, desinfecta y deodoriza la muestra.

 

MATERIAL Y EQUIPO

·         Probeta graduada de 100 ml con tapón esmerilado.

·         Pipetas de Stoll o graduadas de 2 ml en 0.01 ml.

·         Varilla de vidrio de 20 cm de longitud.

·         Perlas de vidrio.

·         Microscopio.

·         Portaobjetos de 74 X 38 mm.

·         Cubreobjetos de 22 X 40 mm.

·         NaOH 0.1 N

METODO

1.-  Se coloca en la probeta Hidróxido de Sodio 0.1 N hasta la marca de 56 ml.

2.- Con la varilla de vidrio, se añade materia fecal hasta aforar a 60 ml.

3.- Si las heces son duras, se espera un tiempo a que se reblandezcan.

4.- Se añaden 15 perlas de vidrio, se tapa la probeta, se agita fuertemente, de arriba abajo, durante 1 minuto, hasta formarse una suspensión homogénea.

5.- Los huevos y restos empiezan a precipitar en cuanto cesa la agitación. Con la pipeta se toma inmediatamente 0.075 o 0.15 ml del centro de la suspensión. Se recomienda el segundo volumen, que da una muestra mayor para el recuento. Llevando la punta de la pipeta al centro del matraz, el error debido a la precipitación de los huevos disminuye.

6.- Se pasa la totalidad del contenido de la pipeta a un portaobjetos y se cubre la gota con el cubreobjetos.

7.- Se examina la preparación sistemáticamente con el objetivo seco débil y se cuentan todos los huevos y larvas presentes cuidando no contar dos veces la misma estructura.

 

CALCULOS

El número de huevos y larvas contados se multiplica por :

·         100, si la materia fecal es dura.

·         200, si la materia fecal es pastosa.

·         400, si la materia fecal es líquida.

Estos factores dependen de la cantidad de agua que las muestras contienen..

El resultado se expresa en huevos o larvas por ml de heces ( H.ml.H)

Los quistes únicamente se reportan, sin cuantificarse.

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