HARADA- MORI

OBJETIVO: Realizar cultivo de huevos para obtener desarrollo de larvas y así poder precisar la especie.

GENERALIDADES: Los huevos uncinariformes observados en muestras fecales pueden ser difíciles o imposibles de diagnosticar, mientras que las larvas que surgen de ellos se identifican fácilmente. Un problema práctico frecuente es la diferenciación de las infecciones por Necator de las producidas por Ancylostoma. Para cultivar larvas a partir de huevos, Harada y Mori (1955) describieron un método sencillo y limpio en tubos de ensaye.

MATERIAL Y EQUIPO:

  • Agua Destilada
  • Tubos de ensaye de punta cónica de 15 ml
  • Gradilla
  • Abatelenguas o aplicadores de madera
  • Tiras de papel filtro de 13 X 120 mm
  • Portaobjetos de 26 X 76 mm
  • Cubreobjetos de 22 X 22 mm
  • Pipetas Pasteur con bulbo
  • Sol. De lugol o ácido acético al 20%
  • Microscopio

METODO:

1.- Se extiende una fina película de heces ( de 1 a 2 mm) en un lado del tercio medio de una tira de papel filtro.

2.- Se coloca el papel en un tubo de ensaye con 3 ml de agua destilada forzando la tira hasta aproximadamente el nivel de 1 cm y presionando el lado limpio contra la pared del tubo.

3.- Se conserva el cultivo a temperatura ambiente (24-28°C) en la oscuridad durante un periodo de 1-5 días añadiendo agua según se vaya necesitando para mantener el nivel bastante por encima del extremo inferior del papel filtro.

El flujo capilar del agua que sube a través del papel y la película fecal mantiene húmedas las heces y transporta sus elementos solubles hacia la parte superior del papel, donde se evaporan o acumulan en un depósito oscuro. Al alcanzar la fase infecciosa, las larvas migran hacia abajo contra la corriente del flujo del agua, y al alcanzar el nivel de ésta se sumergen hacia el fondo, donde pueden verse con una lupa y tomarse con una pipeta para su examen microscópico. La tira de papel filtro puede transferirse a un tubo limpio lleno de agua para recoger las larvas que hayan podido quedar en la película fecal. Algunas especies de larvas tienen tendencia a no migrar hacia abajo. Antes de retirarlas, las larvas pueden inmovilizarse introduciendo el tubo a baño María (50-60°C) o añadiendo una cantidad de ácido Acético al 20%.

 

 

 

                  

 

                             Strongyloides              Necator                Ancylostoma

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

            


 

                               

 

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